YFXEH00258
48T/ 96T
¥1000/ ¥1500
檢測(cè)人相關(guān)樣本中白細(xì)胞介素-6(IL-6)的含量
人
雙抗體一步夾心法
本試劑盒采用雙抗體一步夾心法測(cè)定標(biāo)本中白細(xì)胞介素-6(IL-6)的水平。向預(yù)先包被白細(xì)胞介素-6(IL-6)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素-6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
1、準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值≥ 0.9900。
2、靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0pg/mL。
檢測(cè)人相關(guān)樣本中的白細(xì)胞介素-6(IL-6),且與其它相關(guān)蛋白無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
試劑盒成分 |
96孔 |
48孔 |
儲(chǔ)存溫度 |
說(shuō)明書(shū) |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
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密封袋 |
1個(gè) |
1個(gè) |
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微孔酶標(biāo)板 |
12孔×8條 |
12孔×4條 |
2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
2-8℃ |
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0pg/mL、20pg/mL、40pg/mL、80pg/mL、160pg/mL、320pg/mL。 |
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樣本稀釋液 |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
檢測(cè)抗體-HRP |
10mL |
5mL |
2-8℃ |
20×洗滌緩沖液 |
25mL |
15mL |
2-8℃ |
注:20×洗滌緩沖液使用前用蒸餾水按1:20的比例稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。 |
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底物A |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
底物B |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
終止液 |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4(建議組織重量與PBS體積比例為1:9,即1g組織,加入 9mL PBS)。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3、濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5、所有液體組分使用前充分搖勻。
※ IF=11.4,Li Chen,Tangdi Xu,Zixuan Wang,et al. Loss of Nup155 promotes high fructose-driven podocyte senescence by inhibiting INO80 mRNA nuclear export. Journal of Advanced Research, https://doi.org/10.1016/j.jare.2024.08.007
※ IF= 6.208. Jian-Xiang Liu, Dao-Lei Cui, Dan-Lei Yang, et al. Organophosphorus Flame Retardant TCPP Induces Cellular Senescence in Normal Human Skin Keratinocytes: Implication for Skin Aging. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 14306.
※ IF=11.413. Kefeng Zhai, Hong Duan, Wei Wang, et al. Ginsenoside Rg1 ameliorates bloodebrain barrier disruption and traumatic brain injury via attenuating macrophages derived exosomes miR-21 release. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2021 Nov;11(11):3493-3507.
※ IF=4.315. Jie Zhou, Jie Yang, Yu-Meng Wang, et al. IL-6/STAT3 signaling activation exacerbates high fructose-induced podocyte hypertrophy by ketohexokinase-A-mediated tristetraprolin down-regulation. Cell Signal. 2021 Oct;86:110082.
※ IF=5.279. Ke-feng Zhai, Cai-yue Cui, et al. Liquiritin from Glycyrrhiza uralensis Attenuating Rheumatoid Arthritis via Reducing Inflammation, Suppressing Angiogenesis, and Inhibiting MAPK Signaling Pathway. Agric. Food Chem. 2019, 67, 10, 2856–2864.