YFXER00036
48T/ 96T
￥1000/ ￥1500
檢測大鼠相關樣本中紅細胞生成素(EPO)的含量
大鼠
雙抗體一步夾心法
本試劑盒采用雙抗體一步夾心法測定標本中紅細胞生成素(EPO)的水平。向預先包被紅細胞生成素(EPO)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的紅細胞生成素(EPO)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
1、準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值≥ 0.9900。
2、靈敏度：最低檢測濃度小于0.1mIU/mL。
檢測大鼠相關樣本中的紅細胞生成素(EPO)，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
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試劑盒成分 |
96孔 |
48孔 |
儲存溫度 |
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說明書 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
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密封袋 |
1個 |
1個 |
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微孔酶標板 |
12孔×8條 |
12孔×4條 |
2-8℃ |
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標準品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
2-8℃ |
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注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0mIU/mL、1.5mIU/mL、3mIU/mL、6mIU/mL、12mIU/mL、24mIU/mL。 |
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樣本稀釋液 |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
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檢測抗體-HRP |
10mL |
5mL |
2-8℃ |
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20×洗滌緩沖液 |
25mL |
15mL |
2-8℃ |
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注：20×洗滌緩沖液使用前用蒸餾水按1：20的比例稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。 |
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底物A |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
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底物B |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
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終止液 |
6mL |
3mL |
2-8℃ |
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
1、試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3、濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4、嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5、所有液體組分使用前充分搖勻。
※ IF=4.8，Li Chen, Tangdi Xu, Jiahao Wang，et al. Siwu tablet attenuates high fructose-induced glomerular podocyte senescence in rats through increasing Nup155 to promote INO80 mRNA nuclear export, Journal of Ethnopharmacology 337 (2025) 118878.
